前列环素类似物对调节性T细胞分化的调节作用及机制

目的 探讨前列环素(PGI2)类似物伊洛前列素(Iloprost)对调节性T细胞(regulatoryT cells,Treg)分化的调节作用及其信号机制.方法 采用免疫磁珠分选人外周血初始CD4+ T细胞,体外诱导其向Treg细胞分化,使用流式细胞术、RT-PCR方法分别从Treg细胞频率和Foxp3 mRNA表达2个方面探讨Iloprost对Treg细胞分化的调节作用及其受体机制.之后,使用免疫荧光法测定胞内cAMP含量,流式细胞术检测胞内STAT5磷酸化水平,以探索Iloprost调节Treg细胞分化的信号通路.结果 Iloprost剂量依赖性地降低了Treg细胞频率和Foxp3 mRNA表达(P＜0.05),而IP受体被受体阻断剂(CAY 10449)阻断之后,Iloprost的上述抑制作用大幅回升.Iloprost可上调Treg细胞胞内cAMP水平(P＜0.05),其对Treg细胞分化的调节作用能被cAMP激动剂db-cAMP模拟(P＞0.05),且被蛋白激酶A(PKA)抑制剂H-89所逆转.另外,Iloprost可下调IL-2诱导的STAT5磷酸化(P＜0.05).同时,db-cAMP模拟了Iloprost对pSTAT5的调节作用(P＞0.05),而该作用被H-89抑制.结论 Iloprost通过与IP受体结合,活化cAMP-PKA信号通路,从而下调pSTAT5水平,进而抑制CD4+ T细胞向Treg分化.