重组人程序化细胞死亡5蛋白对顺铂诱导膀胱癌细胞凋亡的影响

目的 观察重组人程序化细胞死亡5(rhPDCD5)蛋白对顺铂(DDP)诱导人膀胱癌BIU87细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测不同浓度的rhPDCD5蛋白和/或DDP对膀胱癌BIU87细胞抑制率的影响;Hoechst 33342染色观察细胞的形态变化;流式细胞术(FCW)检测细胞凋亡率;采用Western blot法检测细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白的表达.结果 CCK-8检测结果显示,rhPDCD5蛋白与DDP能有效抑制BIU87细胞的增殖.Hoechst 33342染色检测显示,rhPDCD5+DDP联合用药组阳性细胞百分比为(31.62±2.33)％,显著高于单用rhPDCD5蛋白组的(9.61±0.42)％和单用DDP组的(14.12±0.24)％,差异有统计学意义(F=221.42,P＜0.01).FCM检测结果显示,rhPDCD5+ DDP联合用药组凋亡率为(58.74±3.48)％,与rhPDCD5组的(18.84±1.23)％和DDP组的(21.25±2.27)％比较,细胞凋亡率明显提高(F=228.93,P＜0.01).Western blot结果显示,联合用药组较单用药组细胞凋亡相关蛋白Caspase-3表达明显增强(F=12.60,P＜0.01),bcl-2表达显著减少(F=12.20,P＜0.01).结论 rhPDCD5蛋白可直接作用于BIU87细胞使细胞凋亡,并对DDP诱导的BIU87细胞凋亡有明显促进作用.