克白合剂通过SCF/Kit/MITF信号通路治疗白癜风的作用机制研究

目的 研究克白合剂治疗白癜风的作用机制.方法 建立正常人表皮黑素细胞(melanocytes,MC)培养体系,加入克白合剂并作用后采用MTT法、L-DOPA法、NaOH裂解法等分别测定MC细胞增殖活性、酪氨酸酶(tyrosinase,Tyr)活性、黑素含量等;测定克白合剂处理后角质形成细胞(keratinocytes,KC)上清对MC细胞的影响;采用特异性抗体ACK2阻断Kit受体后,检测克白合荆处理KC细胞后上清对MC细胞MITF、Tyr表达的影响.结果 克白合剂2,4 mg·mL-1无明显细胞毒性.与对照组比,克白合剂组48 h时MC细胞增殖作用明显升高(P＜0.01),Tyr活性明显升高(P＜0.01), 56 h时,2组黑素含量无显著性差异.克白合剂组对MC细胞c-kit的mRNA表达为对照组的4.43倍;MITF的mRNA表达为对照组的2.98倍;Tyr表达为对照组的2.29倍.加克白合剂后KC细胞上清中干细胞因子(stem cell factor,SCF)量为(52.78± 11.24)ng·mL-1,对照组为(38.43±10.87)ng·mL-1,SCF的mRNA表达量为对照组的3.63倍,MC细胞c-kit的mRNA表达为对照组的4.45倍;MITF的mRNA表达为对照组的4.12倍,Tyr表达为对照组的3.78倍,MC细胞增殖增加1.89倍,黑素合成量增加35％.用特异性抗体ACK2阻断Kit受体后,MC细胞的MITF、Tyr表达明显下降,均不及空白组.结论 克白合剂具有促进MC细胞活力、增加Tyr活性的作用,可能是通过SCF/Kit/MITF信号通路发挥疗效.