中药黄芩苷干预人牙周膜成纤维细胞的作用及分子机制

背景:黄芩苷作为一种重要的中药提取物,近年来的应用被越来越多的研究所提及.实验表明黄芩苷可以促进人牙周膜成纤维细胞的增殖并向成骨分化,但具体分子机制尚不清楚.目的:研究中药提取物黄芩苷对人牙周膜成纤维细胞的增殖促进作用及潜在的分子机制.方法:通过细胞原代培养及光学显微镜下观察人牙周膜成纤维细胞的形态.CCK8法检测黄芩苷对人牙周膜成纤维细胞增殖的促进作用;采用实时定量PCR分析黄芩苷对增殖细胞核抗原表达的影响;实时定量PCR以及流式细胞术分析黄芩苷对细胞凋亡的抑制作用;Western blot及实时定量PCR分析黄芩苷对细胞中骨形态发生蛋白2蛋白与mRNA表达的影响;加入骨形态发生蛋白2抗体来检测黄芩苷对细胞增殖凋亡的作用以及骨形态发生蛋白2表达的变化.结果与结论:①与对照组相比,黄芩苷能够明显促进人牙周膜成纤维细胞增殖,并上调增殖细胞核抗原的mRNA表达水平;②与对照组相比,黄芩苷能够上调Bcl-2 mRNA表达水平,下调Bad mRNA表达水平,流式细胞术结果也显示黄芩苷能够抑制细胞的凋亡;③黄芩苷能够浓度与时间依赖性地上调骨形态发生蛋白2蛋白与mRNA水平;加入骨形态发生蛋白2中和抗体可减弱黄芩苷的调控作用;④结果表明,黄芩苷能够促进人牙周膜成纤维细胞的增殖,其发挥作用的机制可能与上调骨形态发生蛋白2表达有关.