蜘蛛抱蛋属植物内生细菌的多样性及其抗菌活性筛选

[背景]药用植物中蕴含多样性丰富的内生菌资源,这些微生物产生的多种新型物质在制药领域表现出较好的应用前景.[目的]研究蜘蛛抱蛋属(Aspidistra Ker-Gawl.)植物内生细菌的多样性,探索药用植物内生细菌在药用活性产物方面的开发潜力,以期发现具有抗菌活性的次级代谢产物.[方法]对9种13株新鲜的蜘蛛抱蛋植物进行表面消毒,采用5种分离培养基分离内生细菌;根据菌落形态特征排除重复菌株,并测定其16SrRNA基因序列,构建系统进化树分析内生细菌多样性;将菌株分别用2种培养基发酵,使用耻垢分枝杆菌(Mycobactrium smegmatis ATCC 700044)、水稻白叶枯菌(Xanthomonas oryzae PX099A)、白色念珠菌(Candida albicans ATCC 10231)、肺炎雷伯菌pneumoniae ATCC 700603)和耐药粪肠球菌HH22(Enterococcusfaecalis HH22) 5种检定菌对分离菌株的发酵液进行抑菌活性筛选.[结果]从植物组织中分离得到了234株内生细菌,根据形态初步排重得到156株植物内生细菌;基于16SrRNA基因序列构建的系统进化树显示它们分属于3门10目22科29属,其中链霉菌属(Streptomyces)、芽孢杆菌属(Bacillus)、微杆菌属(Microbacterium)、类芽孢杆菌属(Paenibacillus)和根瘤菌属的菌株广泛地分布在不同种的蜘蛛抱蛋植株中,且占据一定优势;发现可能的潜在新分类单元6个;156株内生细菌中38株菌的发酵液具有抑菌活性,初筛阳性率为23.7％.[结论]蜘蛛抱蛋植物组织中含有种类多样的内生细菌,它们可能是抗菌生物活性次级代谢产物的有效来源.