IL-33在小鼠皮肤创伤后损伤时间推断中的作用

目的 通过观察白细胞介素-33(interleukin-33,IL-33)在皮肤创伤后的时序性变化规律,探讨IL-33在法医学实践中用于损伤时间推断的应用价值.方法 利用直径为5 mm的圆形锉刀在小鼠背部建造皮肤损伤模型,于伤后1h、3h、6h、12h、1d、3d、5d、7d、10d取损伤处组织,对照组在与创伤组小鼠相同部位取同等大小的皮肤样本.采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察皮肤创伤后愈合过程中的形态学变化,通过Western印迹法、免疫组织化学染色和双重免疫荧光染色法检测皮肤创伤样本IL-33的表达变化.结果 Western印迹法结果显示,伤后3 h,IL-33蛋白表达稍有下降,6 h后IL-33蛋白表达逐渐增加,于伤后3d达峰值,随后逐渐减少.免疫组织化学染色结果显示,在对照组皮肤的表皮、毛囊、皮脂腺及真皮中固有细胞有少量IL-33阳性表达,伤后3 h,IL-33阳性细胞率开始增加,伤后3 d达到峰值,随后逐渐减少.双重免疫荧光染色结果显示,伤后1～3 d,IL-33阳性表达细胞主要为巨噬细胞,伤后5～7 d,IL-33阳性表达细胞主要为肌成纤维细胞.HE染色结果显示该皮肤损伤模型创口愈合过程符合炎症的病理学发展规律.结论 IL-33有望成为法医学推断皮肤损伤时间的参考指标.