诸葛菜种子水提物对硫代乙酰胺诱导小鼠急性肝损伤的保护作用研究

该实验研究了诸葛菜种子水提物对硫代乙酰胺(TAA)诱导小鼠急性肝损伤的保护作用.将雄性ICR小鼠随机分为7组:正常组,模型组,双环醇阳性对照组(200 mg· kg-1)及葵花护肝片阳性对照组(350 mg· kg-1),诸葛菜种子水提物低(125 mg·kg-1)、中(250 mg·kg-1)、高(500 mg·kg-1)剂量组.各组按照0.02 mL·g-1灌胃给药,每日1次,连续给药4d,第4天给药后1h,除正常组外均腹腔注射硫代乙酰胺溶液100 mg·kg-1建立急性肝损伤模型,24h后脱臼处死取血、取材.计算肝脏指数;检测血清中ALT,AST,TBiL活性及肝组织中SOD,GSH-Px的活性,MDA,GSH的含量;HE染色法观察肝组织病理变化;Western blot法检测NF-κB p65,Keap-1,Nrf2,p-p38,p-ERK,p-JNK,Bax,Bcl-2,caspase-3,cleaved caspase-3,caspase-8蛋白的表达.结果 表明,与模型组相比,诸葛菜各给药组均能明显改善肝脏病理变化,降低肝损伤小鼠血清中ALT,AST,TBiL活性,其高剂量组肝脏组织匀浆上清中SOD与GSH-Px活性升高,GSH含量升高,MDA含量降低,同时可致肝组织中Bax,Keap-1,p-p38,p-JNK,p-ERK,NF-κB p65,cleaved caspase-3蛋白表达水平减少和Nrf2,Bcl-2,caspase-3,caspase-8蛋白表达水平增加.因此,诸葛菜种子水提物对硫代乙酰胺溶液所致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用,其机制可能与下调Keap-1,上调Nrf2蛋白表达减轻氧化应激,抑制p38,ERK的磷酸化水平,进而抑制NF-κB信号通路的激活,抑制JNK蛋白的磷酸化,下调Bax,上调Bcl-2蛋白的表达,抑制肝细胞凋亡有关.