靶向乙型肝炎病毒的外源性microRNA的构建及作用

[目的]探讨靶向乙型肝炎病毒的外源性microRNA(amiRNA)的构建及其抑制HBV复制的作用.[方法]应用Invitrogen公司miRNA在线设计软件(BLOCK-iTTMRNAi Designer)针对HBV基因设计4条amiRNA序列;构建amiRNA真核表达质粒,Lipofectamine2000转染至人肝癌细胞株HepG2.2.15;荧光定量PCR检测HBV-DNA,ELISA检测HBsAg和HBeAg表达水平.[结果]设计合成的4条amiRNA均可下调培养体系中HBV-DNA水平以及HBsAg和HBeAg水平,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).其中以miR3抑制HBV-DNA复制的效果最为显著.[结论]靶向HBV基因适当位点设计合成的amiRNA在体外可以有效抑制HBV的复制.