脑胶质瘤IDH2基因突变HRM检测方法的初步建立

China Biotechnology（2013）

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摘要

异柠檬酸脱氢酶2(IDH2)基因突变常常发生于WHOⅡ-Ⅲ级的星形细胞瘤,少突胶质细胞瘤,和大部分继发性胶质母细胞瘤中.在临床上,IDH2突变已经显示对胶质瘤患者有诊断和预后意义.拟通过提取胶质瘤石蜡包埋组织DNA,优化PCR反应条件,初步建立IDH2基因突变高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)检测方法.并与直接测序法对比,观察反应体系的检测灵敏度和稳定性.响应面分析结果证明20μl HRM反应体系中,引物浓度0.6μmol/L,模板量45ng,Mg2+浓度2.75mmol/L,退火温度52.5℃为最佳.HRM检测IDH2基因突变的结果和直接测序法一致,但灵敏度更高.表明所建立HRM方法简单,特异性强,准确可靠,可为IDH2突变检测的临床应用提供借鉴和依据.

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关键词

detecting idh2 gene mutations,gliomas,high resolution melting analysis

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