Les vésicules extracellulaires (EVs) de mélanome possèdent des propriétés immunomodulatrices

Introduction Le melanome est un des cancers les plus agressifs. Malgre des recherches intensives, le diagnostic precoce de cette pathologie est delicat tout comme son pronostic. Les vesicules extracellulaires (EVs) sont de petites structures secretees par de nombreux types cellulaires servant de voie de communication entre les cellules. Des recherches actives se sont developpees concernant ces vesicules qui ont un impact direct dans la physiopathologie de la progression cancereuse en inhibant le systeme immunitaire mais qui peuvent egalement servir de biomarqueur ou de vecteur pour apporter des molecules therapeutiques. Dans cette etude, nous avons estime la capacite de production d’EVs par des lignees de melanome issues de metastases de patient et evalue leurs proprietes immunomodulatrices sur des PBMCs allogeniques. Materiel et methodes La lignee cellulaire a ete obtenue a partir du ganglion axillaire d’un patient atteint d’un melanome de l’abdomen avec mutation BRAFV600E. Les cellules de la lignee sont cultivees pendant 3 jours et le surnageant de culture est recupere pour isoler les EVs par ultracentrifugation a 100 000 g pendant 15 h. Une caracterisation de la concentration et de la taille de ces vesicules est realisee par qNano. Les EVs sont ensuite deposees sur des PBMC stimules au PHA/IL2 pendant 4 jours a 3 concentrations differentes (500 000, 1 × 106 et 10 × 106 EVs) et leur impact sur la proliferation de ces PBMC est evalue par cytometrie en flux. Resultats La quantification des EVs a permis d’estimer la concentration produite pendant 3 jours par les cellules de lignee de melanome a 6,84 × 108 particules/mL. La taille des particules est variable avec une moyenne de 388 ± 285 nm. De facon interessante, l’incubation de 10 × 106 EVs avec les PBMCs inhibe leur proliferation (58,55 % de proliferation en condition controle versus 35,09 % avec les EVs). Par ailleurs, la proliferation des lymphocytes CD4+ et CD8+ est inhibee respectivement de 56,00 % a 34,85 % et de 70,28 % a 50,32 %. Discussion Ces resultats preliminaires permettent d’affirmer que les cellules de melanome produisent des EVs de taille importante pouvant correspondre a des micro-vesicules (100 a 1000 nm). De facon extremement interessante, nous montrons que les EVs de melanome inhibent la proliferation des lymphocytes CD4+ et CD8+. Il sera primordial de realiser un phenotypage des molecules de surface presentes sur les vesicules ainsi que de leur contenu afin de determiner quels facteurs secretes possedent un potentiel immunomodulateur. D’autre part, il sera necessaire de reproduire ces travaux sur d’autres lignees et egalement de correler le potentiel immunomodulateur de ces vesicules avec l’evolution clinique du patient. Ceci permettra de mieux apprehender les mecanismes d’action du developpement du melanome et de proposer de nouveaux outils therapeutiques permettant de faciliter la reconnaissance de la tumeur par le systeme immunitaire.