mTOR非依赖途径介导二甲双胍对类风湿关节炎大鼠心血管损伤的作用及机制

目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)非依赖途径介导二甲双胍对类风湿关节炎(RA)大鼠心血管损伤的作用及其机制.方法:取健康雄性Wistar大鼠32只,8只作对照(Con组,生理盐水灌胃),余24只构建RA大鼠模型后随机均分为模型组(RA组,生理盐水灌胃)、Met治疗组[Met组,400 mg/(kg·d)Met灌胃]、联合治疗组[Met+CC组,400 mg/(kg·d)Met灌胃联合AMPK抑制剂Compound C 20 mg/(kg·d)腹腔注射],大鼠出现二次反应起开始干预,总实验周期8周;实验结束时,称重后麻醉各组大鼠,经腹主动脉采血2 mL,取心脏及胸主动脉予福尔马林固定、4％甲醛浸泡制作病理切片,采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠心血管组织学变化,采用流式细胞仪检测各组大鼠血清 γ干扰素(INF-γ)、白细胞介素-6(IL-6)及IL-17的含量,采用免疫组织化学法检测各组大鼠心血管组织血管内皮生长因子(VEGF)、mTOR及磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)蛋白的表达.结果:RA组与Met+CC组大鼠心肌细胞出现不同程度的变性坏死、炎性细胞浸润、血管平滑肌玻璃样变性及外膜纤维化等,Met组大鼠病变程度较RA组减轻;RA组大鼠血清INF-γ、IL-6及IL-17含量分别较Con组升高(P<0.05),Met组INF-γ、IL-6含量分别较RA组、Met+CC组降低(P<0.05);与Con组比,RA组大鼠心血管组织VEGF、mTOR表达升高但AMPK表达下降(P<0.05);与RA组、Met+CC组比较,Met组大鼠心血管组织VEGF水平降低但AMPK、mTOR升高(P<0.05).结论:Met可以降低RA大鼠VEGF表达,减少炎症反应,从而减轻RA大鼠早期心血管损伤,其机制可能与上调大鼠心血管AMPK的表达有关.