基于浸泡法的牙鲆耳石锶标记技术研究

为了探究耳石微化学标记技术在牙鲆增殖放流中的应用, 以全长(1.56±0.16) cm的牙鲆幼鱼为研究对象, 在其养殖水中分别添加0.5 mg/L、2 mg/L、8 mg/L、32 mg/L SrCl2·6H2O, 以无添加 SrCl2·6H2O组为对照组, 人为改变牙鲆幼鱼生存环境中Sr2+浓度72 h, 研究不同浓度 SrCl2·6H2O对牙鲆耳石锶标记效果.标记期间每24 h换水1次, 换水量为50%, 换水后补加SrCl2·6H2O至原始浓度, 记录各浓度组标记期间及标记后的鱼苗死亡数量.利用X射线电子探针微区分析仪(EPMA)对耳石样本进行分析, 定量线分析结果表明, 0.5 mg/L、2 mg/L SrCl2·6H2O浸染不能形成牙鲆耳石锶标记.8 mg/L浓度组出现Sr峰区, Sr/Ca (Sr:Ca×1000) 均值为4.50～6.60, Sr峰值为5.49～8.49.32 mg/L 浓度组Sr峰区均值为4.83～7.55, Sr峰值为5.62～11.04.这说明8 mg/L、32 mg/L SrCl2·6H2O可对牙鲆耳石进行锶标记.但8 mg/L浓度组出现未标记样本, 且Sr峰区均值较32 mg/L 浓度组低.32 mg/L浓度组Sr/Ca比值显著增高, 即锶标记的 Sr/Ca 比值为 6.61±0.86, 与标记前和对照组 Sr/Ca 比值差异均显著(P＜0.05), 锶标记率100%.面分布分析(mapping analysis)结果表明, 从8 mg/L SrCl2·6H2O浓度组开始, 耳石出现红色"高锶标记环", 与耳石本底颜色对比明显, 且随浓度升高, 红色"高锶标记环"由浅变深, 锶标记效果明显增强.单因素方差分析和Duncan 多重比较结果显示, 各浓度组全长、体重与对照组差异不显著(P＞0.05), 不同浓度的 SrCl2·6H2O 对牙鲆幼鱼生长无影响.经χ2检验, 各浓度组在浸泡标记期间死亡率及标记后养殖90 d的累积死亡率无显著性差异(P＞0.05),不同浓度的SrCl2·6H2O对牙鲆幼鱼死亡率无显著影响.因此, 32 mg/L SrCl2·6H2O为最佳标记浓度.