Des Globules Rouges Humains Biotinylés : Une Approche Prometteuse Pour La Mesure De Leur Survie Dans Des Études Cliniques
Transfusion clinique et biologique(2019)
Abstract
La biotine (Bio) est une alternative aux radioisotopes pour tracer les globules rouges (GR). La survie de plusieurs populations de GR couverts de différentes densités de Bio a été comparée simultanément lors d’études cliniques américaines en suivant leur survie dans la circulation ex vivo par cytométrie en flux (CF) avec la Streptavidine (SA) (Mock et al, Transfusion, 2018). À ce jour, les BioGR transfusés à l’homme et le réactif BioSulfoNHS ne sont pas conformes aux BPF. De plus les BioGR (Bio≥ 18 μg/mL) ont provoqué, dans de rares cas, une immunisation des receveurs (Schmidt et al, Transfusion 2017). C’est un frein pour les autorités réglementaires européennes. Décrire un protocole de multi-marquage des GR conforme aux BPF en raffinant les niveaux de Bio≤ 18 μg/mL. La stérilité est assurée tout au long du procédé. Les GR proviennent de Concentrés de GR standards. La BioSulfoNHS est de grade BPF et le tampon de lavage injectable. L’efficacité du marquage est évaluée en CF avec la SA couplée à 2 fluorochromes différents phycoérythrine (PE) ou le brillant violet (BV421). Le marquage avec la BioSulfoNHS grade BPF ou non BPF est comparable (Tableau 1) et 4 populations de GR sont distinctes. SABV421 de brillance supérieure à SAPE est un outil prometteur pour amplifier la détection des BioGR dans la gamme de Bio≤ 18 μg/mL (Tableau 2). Cette étude préliminaire explore la faisabilité de produire des BioGR destinés aux études cliniques. Les avantages de la méthode sont de s’affranchir de radioisotopes, de réduire le risque d’immunisation, de suivre simultanément plusieurs populations de GR, en conséquence de limiter le nombre de volontaires.
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