腹腔注射内毒素制备脓毒症心肌抑制大鼠模型的验证

目的 通过心脏超声方法验证脓毒症心肌抑制大鼠模型的建立.方法 按随机数字表法将成年雄性SD大鼠分为对照组和模型组,每组10只.以腹腔注射内毒素10 mg/kg制备脓毒症心肌抑制动物模型;对照组则给予相应体积生理盐水.制模后8 h进行心脏超声检测,分别测量左室舒张期末内径(LVDd)、左室舒张期末容积(LVEDV)、左室收缩期末内径(LVDs)、左室收缩期末容积(LVESV)、左室射血分数(LVEF)、右室舒张期末内径(RVDd)、右室收缩期末内径(RVDs)、心率(HR)、肺动脉正向流速、主动脉流速.随后处死大鼠,获取血清和心肌组织,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核转录因子- κB (NF-κB)、白细胞介素-1(IL-1)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、B型脑钠肽(BNP)水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测心肌组织TNF-α、IL-1、NF-κB mRNA表达;采用苏木素-伊红(HE)染色,于光镜下观察心肌组织病理学改变.结果 与对照组比较,模型组大鼠心肌抑制明显,表现为心脏整体外形扩大,HR明显增快(次/min :449.0±21.1比356.7±23.3,P＜0.01),左心和右心功能均有影响,以左心功能受损为主,LVDd、LVDs、LVEDV、LVESV均扩大〔LVDd(mm):10.03±0.95比7.04±0.71,LVDs(mm):5.95±0.71比3.07±0.05, LVEDV(mL):2.11±0.53比0.81±0.21,LVESV(mL):0.51±0.16比0.07±0.01,均P＜0.05〕,LVEF明显下降(0.760±0.046比0.901±0.025,P＜0.01),RVDd明显增大(mm :4.48±0.58比3.22±0.20,P＜0.05),肺动脉正向流速明显下降(cm/s :64.2±9.3比89.0±0.8,P＜0.05).与对照组相比,模型组血清NF-κB、TNF-α、IL-1、BNP、cTnI水平均明显升高〔NF-κB(ng/L):103.84±6.55比57.29±41.34,TNF-α(ng/L):1 198.32±164.07比835.45±24.01,IL-1(ng/L):1 089.90±221.96比746.19±165.83,BNP(ng/L):1 097.36±293.84比454.71±197.79, cTnI(ng/L):6 938.59±1 400.21比3 731.90±1 349.31,均P＜0.01〕,心肌组织TNF-α、NF-κB、IL-1的mRNA表达也明显升高(2-ΔΔCT:1.50±0.42比0.71±0.40,1.10±0.17比0.63±0.06,1.77±0.67比0.10±0.03,均P＜0.05).光镜下观察,对照组心肌组织结构正常,心肌纤维排列整齐,细胞间结构清晰;模型组心肌组织间结构较疏松、模糊,细胞肿胀,具有明显的病理学改变.结论 经心脏超声、炎性因子表达、心肌标志物测定、病理学观察等评估心功能,验证腹腔注射10 mg/kg内毒素可成功制备脓毒症心肌抑制大鼠模型.