以生物信息学工具探讨“三焦”针法治疗老年性痴呆的细胞生物学机制

目的:观察“三焦”针法对快速老化痴呆小鼠(SAMP8)痴呆状况的影响,探讨“三焦”针法治疗老年性痴呆的细胞生物学机制.方法:将7月龄SAMP8随机分为对照组、穴位组和非穴组,每组20只.穴位组取“膻中”“中脘”“气海”“血海”“足三里”穴针刺治疗,每穴针刺30 s,每周针刺6d,连续4周.以Morris水迷宫隐蔽平台实验、空间探索实验检测SAMP8学习记忆能力的变化;提取小鼠海马组织,以基因芯片方法获得针刺相关的差异表达基因,再通过生物信息数据库工具分析差异表达基因的信息,利用等重同位素定量蛋白质组学技术(iTRAQ)和免疫荧光技术观察海马神经细胞及突触形态验证基因芯片分析结果.结果:与对照组和非穴组相比,穴位组小鼠第4、5天的逃避潜伏期显著缩短,停留在原象限平台的时间显著增加(P＜0.05).与非穴组比较,穴位组上调差异基因的细胞定位主要集中于神经元突起、细胞骨架.穴位组286个表达上调的蛋白中,与神经突起、细胞骨架相关的蛋白组分共有47个,多于非穴组的11个.免疫荧光结果显示,与对照组和非穴组比较,穴位组海马组织神经元突起结构更完整、更密集.穴位组神经元突起高亮区高度显著大于非穴组和对照组(P＜0.05).结论:调节神经元突起和细胞骨架相关基因和蛋白表达及相关功能,可能是“三焦”针法治疗老年性痴呆的细胞学机制之一.