不同药物对基于TGF-β/mTOR信号通路所致兔气管狭窄的影响机制

目的 探讨不同药物对基于转化生长因子-β/雷帕霉素靶蛋白(TGF-β/mTOR)信号通路所致气管狭窄的影响机制.方法 将30只家兔完全随机分为正常对照组、生理盐水组、青霉素组、布地奈德组、红霉素组5组,正常对照组不做处理,其余各组均建立气管狭窄模型.建模后第1～10天,建模各组分别予以生理盐水灌胃(0.75 ml/kg,2次/d)、肌肉注射青霉素(40 000 U/kg,2次/d)、红霉素灌胃(12.5 mg/kg,2次/d)、雾化吸入布地奈德(0.05 mg/kg,2次/d)处理.术后第11天处死家兔,收集气管标本,测气管狭窄度.运用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测白细胞介素(IL)-6、TGF-β、Ⅰ型胶原蛋白(COL-1)、Ⅲ型胶原蛋白(COL-3)、沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT-1)mRNA的相对表达量;免疫组化检测mTOR、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、血管内皮生长因子(VEGF)、SIRT-1蛋白阳性表达情况;运用Western印迹法检测核因子(NF)-κB及其磷酸化(p-NF-κB)、AKT,p-AKT、mTOR蛋白表达情况.结果 正常对照组、生理盐水组、青霉素组、布地奈德组、红霉素组气管狭窄度差异均有统计学意义[(14.02±2.86)％、(64.14±3.21)％、(49.11±2.96)％、(39.52±2.09)％、(32.60±4.27)％](均P＜0.05).除红霉素组与正常对照组IL-6 mRNA外,其余各组IL-6 mRNA(1.00±0.00、9.02±1.50、4.25±0.87、2.53±0.17、1.31±0.56)、TGF-β mRNA(1.00±0.00、6.92±0.84、3.83±0.44、2.13±0.25、1.40±0.15)相对表达量差异均有统计学意义(均P＜0.05).除红霉素组与布地奈德组SIRT-1蛋白外,其余各组SIRT-1mRNA(1.000±0.000、0.209±0.042、0.375±0.034、0.555±0.028、0.667±0.032)及SIRT-1蛋白(16.93±2.28、4.77± 1.45、7.70±0.61、10.76±1.04、11.03±1.10)的相对表达量差异均有统计学意义(均P＜0.05).免疫组化各组mTOR蛋白(9.28±4.56、58.18±8.12、44.75±5.56、32.82±5.99、24.73±3.56)、p-AKT蛋白(16.57±4.86、61.79±6.66、42.98±5.99、32.79±5.34、24.00±4.40)相对表达量差异均有统计学意义(均P＜0.05).Western印迹检测各组NF-κB、p-NF-κB、AKT、p-AKT、mTOR蛋白表达与免疫组化相关蛋白趋势一致,生理盐水组NF-κB、AKT、mTOR的蛋白相对表达量均高于其他各组,红霉素组低于布地奈德组、且均低于青霉素组;除红霉素组与正常对照组mTOR蛋白外,其余各组差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 青霉素、红霉素、布地奈德可通过升高SIRT-1减轻炎症反应,减轻基于TGF-β/mTOR通路所致的兔气管瘢痕增生,改善气管狭窄程度.