罗非鱼肾脏细胞系的建立及其生物学特性

采用组织块移植法,对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)的肾脏组织细胞进行原代培养,建立了罗非鱼肾脏细胞系,已稳定传代培养50代以上,命名为TiK.罗非鱼肾脏细胞系为纤维样细胞,其最佳培养基为DMEM,最适培养温度为28℃,最适血清浓度为15％.在最适培养条件下,罗非鱼肾脏细胞系的群体倍增时间为45.8 h.细胞经液氮冷冻保存6个月后进行复苏,经台盼蓝染色,约(89.84±3.48)％的细胞具有活性,复苏后细胞生长旺盛.染色体分析显示,第32代罗非鱼肾脏细胞系染色体数目分布在20～66之间,众数为48.使用本实验室分离鉴定的罗非鱼病毒感染罗非鱼肾脏细胞,可产生典型的细胞病变效应,表明罗非鱼肾脏细胞对该病毒敏感.该细胞系的建立为罗非鱼病毒病防控技术研究提供了重要的实验材料.