Évaluation du prélèvement de sang sur papier buvard analysé par UHPLC-HRMS pour le criblage large échelle de drogues et de médicaments

Objectif Developpement, validation et implementation en routine d’une methode de criblage de drogues et medicaments a partir d’un micro-prelevement de sang sur papier buvard (DBS) en utilisant la spectrometrie de masse haute resolution (HRMS) couplee a la chromatographie liquide ultra haute-performance (UHPLC). Methodes Une methode UHPLC-HRMS a ete developpee pour l’analyse de DBS. Pour ce faire, deux spots de 10 μL de sang complet ont ete dopes avec 142 standards representatifs des substances trouvees dans des cas cliniques et de suspicion de consommation de drogues et medicaments au volant (MDV). La methode est basee sur une acquisition en mode full-scan en ionisation positive suivi d’une fragmentation en donnees dependantes (DDA) basee sur une liste d’inclusion de 1008 composes, incluant notamment des nouvelles substances psychoactives (NPS). Au cours de la meme analyse, une acquisition ciblee (Tsim) en ionisation negative est realisee sur l’ion [M-H]− du 11-nor-9-carboxy-delta-9-tetrahydrocannabinol (THC-COOH). La methode a ete evaluee par validation croisee en comparant les substances detectees dans 94 cas MDV avec les resultats de deux autres approches actuellement utilisees en routine [1] , [2] pour repondre aux demandes cliniques et forensiques. Resultats La methode developpee a permis la detection de l’ensemble des 142 substances representatives. Les limites d’identification (LOIs) ont ete determinees sur un echantillon de 30 substances. Celles-ci ont ete mesurees comme etant egales ou inferieures a 20 ng/mL, malgre le faible volume de sang utilise. La methode a egalement ete evaluee grâce a l’utilisation de controles de qualite externes. La comparaison de 94 cas entre la methode HRMS developpee, une methode ciblee commerciale pour la toxicologie clinique (Bruker Toxtyper™) [1] appliquee apres extraction liquide-liquide sur 0,5 ml de sang complet, ainsi qu’une methode ciblee developpee sur un systeme QTrap pour l’analyse de DBS a permis de confirmer l’interet de l’approche HRMS. Au total, 271 identifications de 79 substances differentes ont ete effectuees. La methode HRMS developpee dans ce projet a montre des meilleurs resultats, en identifiant 98,9 % de la totalite des substances contre 71,6 % pour l’approche Toxtyper et 56,8 % pour l’approche QTrap. Le THC-COOH a ete detecte dans 50 % des cas mesures et est le principal responsable de ce gain de performance obtenue grâce a l’approche HRMS, confirmant ainsi la necessite d’implementer cette substance dans les approches de criblage. Conclusion Le recent developpement des appareils HRMS amenant un gain de sensibilite permet d’utiliser le DBS comme micro-prelevement pour le screening toxicologique large echelle.