Termofilik Geobacillus sp. TF14'ten Saflaştılan α-amilaz Enziminin Kitosan Boncuklara Kovalent İmmobilizasyonu

Bu calismada, daha once Geobacillus sp. TF14den saflastirilmis α-amilaz enzimi, kitosan boncuklara kovalent olarak immobilize edildi. Kitosan boncuklar, toz haldeki kitosanin % 5’lik asetik asit cozeltisinde cozulmesi ve 1 M NaOH cozeltisine damla damla eklenmesiyle elde edildi. Daha sonra boncuklar NaOHu0027in fazlasinin giderilmesi icin ard arda saf su ile yikandi. Immobilizasyon iki asamada gerceklestirildi. Oncelikle, % 2,5 Gluteraldehit cozeltisi ile reaksiyona sokularak kitosan boncuklar aktive edildi. Aktive edilmis kitosan boncuklar immobilizasyonun tamamlanmasi icin enzim cozeltisi ile karistirildi. Immobilize edilen α-amilazin biyokimyasal karakterizasyonu da gerceklestirildi. Immobilize α-amilazin pH 9,00u0027da maksimum aktiviteye ulastigi ve enzimin 48 saatlik bir surede bu pHu0027da oldukca kararli oldugu tespit edildi. Immobilize enzimin optimum sicaklik degeri 95 °C olarak belirlendi. Enzimin, bu sicaklikta 48 saat inkubasyon isleminden sonra baslangictaki aktivitesinin % 50u0027sini korudugu tespit edildi. Mn 2+ , Co 2+ ve EDTA’nin immobilize enzim aktivitesini neredeyse tamamen inhibe ettigi, diger metal iyonlarinin farkli oranlarda inhibisyona neden oldugu belirlendi. Bazi deterjanlar varliginda enzimin aktivitesini korudugu tespit edildi. Immobilize edilen α-amilazin nisasta esasli bircok sanayi alaninda kullanilabilecegi sonucuna varilabilir.