Virtuelle Histologie kolorektaler Läsionen durch Konfokale Lasermikroskopie

Problemstellung: Die histologische Untersuchung von gastrointestinalen Läsionen basiert üblicherweise auf der lichtmikroskopischen Betrachtung dünnschichtiger Hämatoxylin- und Eosin-gefärbter Gewebsproben. In einer Studie wurde der Nutzen der Konfokalen Lasermikroskopie (KLM), mit der man sofort ein mikroskopisches Bild erhält, an unbehandelten Gewebepartikeln kolorektaler Läsionen, untersucht. Der Prototyp eines KLM-Mikroskops in Sondenform, das über den Arbeitskanal eines Endoskops vorgeschoben werden kann, wurde ebenfalls entwickelt. Material und Methoden: Untersucht wurden kolorektale Läsionen, die entweder endoskopisch oder chirurgisch am „Showa University Nothern Hospital” entnommen worden waren. Einhundert Gewebepartikel wurden mittels KLM untersucht. Die histopathologischen Befunde der Läsionen waren: In sieben Fällen normale Kolonmukosa, fünf hyperplastische Polypen, 68 Adenome mit „low-grade” Dysplasie, 10 Adenome mit „high-grade” Dysplasie und 10 Adenokarzinome. Für die KLM-Studie wurde ein Argon Laserstrahl mit einer Wellenlänge von 488 nm verwendet. Durch das Endomikroskop war es möglich, sowohl resezierte normale Kolonschleimhaut (in vitro), wie Rektumschleimhaut gesunder Freiwilliger zu untersuchen. Die KLM-Bilder jeder Probe wurden mit dem Hämatoxylin-Eosin gefärbten Gewebeschnitt verglichen. Ergebnis: Die Bilder der Konfokalen Lasermikroskopie stimmen gut mit den lichtmikroskopischen HE-gefärbten Gewebeschnitten überein.In der normalen Mukosa oder in hyperplastischen Polypen werden die Zellkerne nicht dargestellt. In Adenomen mit hochgradigen Dysplasien und Karzinomen sind die Zellkerne häufiger sichtbar als bei Adenomen mit „low grade” Dysplasien. Die Kerndarstellungshäufigkeit unterschied sich zwischen diesen beiden Gruppen signifikant (60 % vs. 10,3 %; p < 0,01).Endomikroskopisch gewonnene KLM-Bilder konnten die Orifizien der Drüsenzellen des Kolons und der Becherzellen in vitro und in vivo darstellen. Schlussfolgerungen: Die Konfokale Lasermikroskopie liefert Sofortbilder die gut mit HE-Schnitten übereinstimmen. Eine verbesserte Sonde zur endoskopischen Anwendung der Konfokalen Lasermikroskopie wird entwickelt. Sie wird vermutlich bessere histologische Bilder kolorektaler Läsionen liefern.