TRIAGEM NEONATAL DE IMUNODEFICIÊNCIAS GRAVES COMBINADAS POR MEIO DE TRECS E KRECS: SEGUNDO ESTUDO PILOTO NO BRASIL

Objetivo: Validar a quantificacao de T-cell receptor excision circles (TRECs) e kappa-deleting recombination circles (KRECs) por reacao em cadeia de polimerase (polymerase chain reaction, PCR) em tempo real (qRT-PCR), para triagem neonatal de imunodeficiencias primarias que cursam com defeitos nas celulas T e/ou B no Brasil. Metodos: Amostras de sangue de recem-nascidos (RN) e controles foram coletadas em papel-filtro. O DNA foi extraido e os TRECs e KRECs foram quantificados por reacao duplex de qRT-PCR. O valor de corte foi determinado pela analise de Receiver Operating Characteristics Curve, utilizando-se o programa Statistical Package for the Social Sciences (SSPS) (IBM®, Armonk, NY, EUA). Resultados: 6.881 amostras de RN foram analisadas quanto a concentracao de TRECs e KRECs. Os valores de TRECs variaram entre 1 e 1.006 TRECs/µL, com media e mediana de 160 e 139 TRECs/µL, respectivamente. Tres amostras de pacientes diagnosticados com imunodeficiencia grave combinada (severe combined immunodeficiency, SCID) apresentaram valores de TRECs abaixo de 4/µL e um paciente com Sindrome de DiGeorge apresentou TRECs indetectaveis. Os valores de KRECs encontraram-se entre 10 e 1.097 KRECs/µL, com media e mediana de 130 e 108 KRECs/µL, e quatro pacientes com diagnostico de agamaglobulinemia tiveram resultados abaixo de 4 KRECs/µL. Os valores de corte encontrados foram 15 TRECs/µL e 14 KRECs/µL, e foram estabelecidos de acordo com a analise da Receiver Operating Characteristics Curve, com sensibilidade de 100% para deteccao de SCID e agamaglobulinemia, respectivamente. Conclusoes: A quantificacao de TRECs e KRECs foi capaz de diagnosticar criancas com linfopenias T e/ou B em nosso estudo, validando a tecnica e dando o primeiro passo para a implementacao da triagem neonatal em grande escala no Brasil.