Expression et activité fonctionnelle des Cdk4/2-cyclines dans l’épiderme humain normal et psoriasique

Introduction Les kinases dependantes des cyclines (Cdk) sont actives si elles forment des complexes avec les cyclines. Les Cdk4/Cycl D1 et Cdk2/Cyc E interviennent dans la regulation du cycle cellulaire : sortie de quiescence et progression a travers la phase G1 pour Cdk4/Cyc D1, transition G1/S pour Cdk2-Cyc E. Notre objectif a ete d’evaluer, dans l’epiderme humain normal et psoriasique, l’expression et l’activite fonctionnelle des Cdk4 et Cdk2 grâce a des biosenseurs cutanes specifiques. Materiel et methodes Notre etude a porte sur 20 malades atteints de psoriasis moderes a severes. Chez chaque patient, des biopsies ont ete pratiquees en peau lesee et en peau saine perilesionnelle. L’expression des molecules d’interet a ete etudiee par immunohistochimie, microscopie confocale et immunoblots epidermiques. La transcription des genes a ete evaluee par qPCR et l’activite fonctionnelle des Cdk4 et Cdk2 a ete quantifiee a l’aide de biosenseurs fluorescents specifiques (WWH3c pour Cdk2, WwshortRbc pour Cdk4) en presence ou des non-inhibiteurs de Cdk2 (roscovitine) et de Cdk4 (abemaciclib). Resultats Il existait une induction de l’expression cytoplasmique des Cdk2 et Cdk4 dans l’epiderme psoriasique avec conservation de celle-ci dans les cellules les plus differenciees. Les immunoblots epidermiques permettaient de confirmer l’induction de Cdk4 et la forte augmentation de Cdk2. Les resultats de l’analyse en qPCR ont montre une discrete inhibition des genes codant pour Cdk4 et une nette inhibition de la transcription de Cdk2. L’activite fonctionnelle de Cdk2 etait augmentee dans l’epiderme lesionnel contrairement a celle de la Cdk4 qui etait effondree. Cette inhibition de Cdk4 en peau lesee etait associee a une augmentation de l’expression cytoplasmique et nucleaire de la cyc D1 et de la proteine p21 en peau lesee. Il existait, en revanche, une diminution de l’expression membranaire de la proteine p27 dans l’epiderme psoriasique. On retrouvait une forte augmentation de l’expression de la proteine p16 (inhibiteur de Cdk4) dans l’epiderme lesionnel. Discussion Il existe in vivo dans l’epiderme psoriasique un effondrement de l’activite fonctionnelle des complexes Cdk4/Cyc D1. Cette inhibition ne resulterait pas d’une diminution de l’expression des proteines Cdk4 et cyc D1 qui sont au contraire fortement exprimees en peau lesee. Elle pourrait etre secondaire a une inhibition de leur degradation par le proteasome. L’effondrement de l’activite des Cdk4 pourrait etre due a une sequestration de ces proteines ou a l’augmentation de leurs inhibiteurs physiologiques p16 et p21. L’augmentation de l’activite des complexes Cdk2/cyc E pourrait resulter de l’augmentation d’expression de la Cdk2. Elle pourrait etre egalement due a une levee d’inhibition par p27 dont l’expression est diminuee dans l’epiderme psoriasique. Conclusion Ces resultats permettent de mieux comprendre les mecanismes de l’homeostasie epidermique au cours du psoriasis.