Qualidade físico-química e atividades biológicas de caseinofosfopeptídeos obtidos por hidrólise tríptica de caseinato de sódio sob diferentes condições

Muitos metodos tem sido empregados na producao de peptideos bioativos para a promocao da saude. O objetivo deste estudo foi produzir caseinofosfopeptideos por hidrolise triptica do caseinato de sodio usando diferentes temperaturas (37 e 50 °C) e tempos de reacao (2 e 4 h), caracteriza-los e analisar sua influencia nas atividades citotoxica, antimicrobiana e antioxidante. Caseinofosfopeptideos foram caracterizados atraves da composicao centesimal, eletroforese em gel de poliacrilamida, Espectrometria de Massas e Cromatografia Liquida de Alta Eficiencia. Toxicidade para leucocitos humanos, atividade antimicrobiana utilizando o teste de microdiluicao em caldo e determinacao da capacidade antioxidante pelo metodo de especies reativas ao acido tiobarbiturico foram os ensaios biologicos realizados. Os resultados mostraram que as quatro fracoes peptidicas obtidas apresentaram-se com baixo peso molecular e elevados teores proteico e mineral; quanto ao perfil aminoacidico, apresentaram elevadas e diferenciadas quantidades de acido glutâmico e serina, que pouco variaram de acordo com o processo de obtencao; nao se mostraram toxicos para leucocitos humanos; demonstraram atividade antimicrobiana para Escherichia coli e Salmonella Enteritidis e elevada capacidade antioxidante. Os resultados fisico-quimicos das fracoes de caseinofosfopeptideos demonstraram elevada composicao nutricional em termos de proteina e, principalmente, calcio. O conjunto de dados indicou que alteracoes no tempo e na temperatura de reacao para a obtencao dos hidrolisados nao interferem nas suas qualidades biologicas, mostrando serem seguros para a promocao da saude e para a aplicacao em situacoes especiais, que envolvem pacientes desnutridos, imunossuprimidos, com comprometimento osseo ou gastrintestinal decorrentes de inflamacoes e infeccoes. PALAVRAS-CHAVE: Caseinofosfopeptideos. Caseinato de sodio. Citotoxicidade. Atividade antimicrobiana. Atividade antioxidante. ABSTRACT Physico-chemical quality and biological activities of Casein phosphopeptides obtained by sodium caseinate tryptic hydrolysis under different conditions Several methods have been employed for the production of bioactive peptides for health promotion. The aim of this study was to produce and characterize Casein phosphopeptides obtained by sodium caseinate tryptic hydrolysis under different temperatures (37 and 50 °C) and reaction times (2 and 4 h), and evaluate their biological capabilities. They have been characterized by assessing their centesimal composition, by polyacrylamide gel electrophoresis, Mass Spectrometry, and High-Performance Liquid Chromatography. The biological activities tested included toxicity for human leukocytes, antimicrobial assay using the microdilution test, and determination of the antioxidant capacity by the thiobarbituric acid reactive species method. The results showed that the four fractions obtained were of low molecular weight with high protein and mineral contents; their amino acid profile showed high and differentiated amounts of glutamic acid and serine independent of the methodological procedures. The results also showed no toxicity for human peripheral leukocytes, demonstrated antimicrobial activity against Escherichia coli and Salmonella Enteritidis as well as high antioxidant capacity. The results of the physico- chemical Casein phosphopeptides’ fractions showed high nutritional composition in terms of protein and, particularly, calcium. The biological assays indicated that time and temperature changes in the process for obtaining casein hydrolysates have not interfered with their biological qualities. In addition, they have proven safe in promoting health in special conditions involving malnourished and/or, immunocompromised patients or those with bone and/or gastrointestinal impairment due to inflammations and infections. Keywords: Casein phosphopeptides. Sodium caseinate. Cytotoxicity. Antimicrobial activity. Antioxidant activity.