Étude des agrégats nucléaires (CUG)n et (CCUG)n dans la dystrophie myotonique de type 1 et de type 2

Introduction Les dystrophies myotoniques (DM1 et DM2) sont des pathologies neuromusculaires invalidantes souvent associees a une morbidite importante (complications cardiaques, respiratoires,…). Bien que caracterisees par un tableau clinique proche, DM1 et DM2 different dans leur expression phenotypique et severite. Elles presentent des anomalies moleculaires communes : les repetitions instables des genes, respectivement DMPK et ZNF9 , sont transcrites en expansions CUG et CCUG qui s’accumulent dans le noyau de la cellule. Un des effets pathogenes de ces agregats, appeles foci est la sequestration de proteines, telles que muscleblind (MBNL), essentielles pour la fonction d’epissage. Objectifs Cette etude a deux objectifs : (1) caracteriser la formation des agregats nucleaires dans le tissu musculaire de patients DM1 et DM2 ; (2) evaluer la pertinence des foci comme biomarqueur pour l’evaluation de l’efficacite de nouvelles therapies chez l’homme. Methode L’hybridation in situ fluorescente (FISH) est la methode optimale pour detecter ces inclusions nucleaires pathogenes. Nous avons mis au point une technique automatisee couplee a une methode d’analyse d’images, qui permet de detecter, denombrer et quantifier la surface des foci nucleaires. Les analyses ont ete realisees sur les biopsies musculaires de patients atteints de DM1 ( n  = 7) et DM2 ( n  = 22). Resultats La methode de FISH automatisee se revele fiable et reproductible pour l’evaluation quantifiee de plusieurs parametres des inclusions nucleaires (frequence de noyaux positifs, nombre de foci et surface nucleaire occupee par les agregats). Nos resultats indiquent des differences notables observees chez les patients atteints de DM1 ou DM2 pour ces parametres d’etude, et ceci en fonction de la taille de la mutation et de l’âge des patients. Conclusion La methode de FISH automatisee conforte l’utilisation des foci comme biomarqueur dans le muscle squelettique et son utilisation en tant que critere d’evaluation des therapies moleculaires ciblant les repetitions pathogenes dans la DM1 et DM2.