慢性脑缺血大鼠模型中海马神经元凋亡与缺血时间的相关性

目的 探讨慢性脑缺血加速大鼠海马神经元凋亡的作用,初步阐明其机制.方法 健康成年雄性SD大鼠90只,随机分为假手术组(n=30)和实验组(n=60),分别于术后第7、14和21天处死取材,每个时间点随机选取假手术组大鼠10只、实验组大鼠20只.实验组大鼠采用结扎双侧颈总动脉的方法,建立慢性脑缺血模型;假手术组颈部正中切口,分离双侧颈总动脉,不做结扎.硫堇染色观察大鼠海马神经元的形态变化;SP免疫组织化学法观察海马神经元Bax和Bcl-2蛋白表达的动态变化;单宁酸-氯化铁媒染法观察大鼠海马微血管构筑的动态变化.采用MiVnt图像分析系统对大鼠海马神经元Bax和Bcl-2蛋白表达、海马微血管密度(MVD)、微血管面积(MVA)进行定量分析.结果 实验组大鼠海马神经元Bcl-2蛋白的表达率与假手术组相比明显降低(P＜0.05);且随缺血时间的延长,Bcl-2蛋白的表达率逐渐下调,21d实验组明显低于与7d实验组(P＜0.05).实验组大鼠海马神经元Bax蛋白的表达率与假手术组相比明显升高(P＜0.05);且随缺血时间的延长,Bax蛋白的表达率逐渐上调,21d实验组明显高于7d和14d实验组(P＜0.05).实验组各时间点大鼠海马的MVA和MVD均较假手术组明显下降(P＜0.05);随着造模时间的延长,MVA和MVD逐渐下降,14d和21d实验组的MVA和MVD明显低于7d实验组(均P＜0.05),且21d实验组的MVD明显低于14d实验组(P＜0.05).结论 慢性脑缺血可致海马MVA、MVD及Bcl-2蛋白的表达进行性下降,Bax蛋白的表达进行性增高,进而导致学习和记忆功能障碍逐渐加重,这可能是血管性痴呆的原因之一.