EGF对食管鳞癌细胞HIF-1α基因表达及功能的影响

目的 研究表皮生长因子(EGF)对人食管鳞癌细胞株HIF-1α基因表达及功能的影响及其对血管生成拟态相关基因表达的影响.方法 将人食管鳞癌细胞株Eca-109、TE13分为试验组(加入含EGF 100 μg/L的无血清DMEM培养液)和对照组(加入无血清DMEM培养液),分别于常氧及缺氧下培养.应用蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞HIF-1α蛋白与血管内皮钙黏附素(sVE-cadherin)、层黏连蛋白(Laminin5γ2)、酪氨酸蛋白激酶受体(EphA2)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)基因蛋白的表达,应用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测HIF-1α与sVE-cadherin、EphA2和MMP-2 RNA的表达,基质胶(Matrigel)三维培养显微镜下观察并计数两组细胞的管状结构.结果 常氧和缺氧情况下,与对照组比较,试验组Eca-109、TE13细胞HIF-1α蛋白与sVE-cadherin、Laminin5γ2、EphA2基因蛋白的表达及sVE-cadherin、EphA2 RNA水平的表达均显著增加,差异均有统计学意义(P＜0.05);而对MMP-2基因蛋白的表达及RNA水平的表达无明显影响,差异无统计学意义(P＞0.05).Eca-109、TE13细胞均可形成典型的管网状结构,试验组在EGF作用下数目增加,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在常氧和缺氧情况下EGF均可促进Eca-109、TE13细胞HIF-1α蛋白与sVE-cadherin、EphA2等基因蛋白及RNA的表达,均可形成典型的管网状结构,且EGF能有效促进肿瘤细胞体外血管生成拟态形成.