脐血干细胞表达转基因TNF-α联合溶瘤病毒对小鼠胃癌移植瘤抑制和杀伤作用
Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment(2015)
Abstract
目的 探讨脐血间质干细胞(umbilical cord blood mesenchymal stem cells,UCB-MSCs)表达转基因肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)联合溶瘤病毒-新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)抑制和杀伤胃癌的作用.方法 构建带有人TNF-α基因的慢病毒载体,感染人脐血间质干细胞,获得重组慢病毒感染的脐血间质干细胞(MSC-TNF-α).人胃癌细胞SGC-7901注射到裸鼠腹股沟皮下建立胃癌移植瘤裸鼠模型,荷瘤裸鼠分为MSC-TNF-α组、MSC-TNF-α联合溶瘤病毒组和生理盐水(NaCl)对照组,每组5只;对3组裸鼠瘤周分别注射MSC-TNF-α、MSC-TNF-α+溶瘤病毒和NaCl,隔日1次,共3次;第4周取材,观察注射前后瘤体生长情况.反转录PCR法测定3组胃癌组织中TNF-α mRNA表达;病理切片观察瘤体坏死面积及肿瘤细胞凋亡情况.结果 MSC-TNF-α组裸鼠肿瘤体积为(1.40±0.23) cm3,MSC-TNF-α+溶瘤病毒组为(0.94±0.28) cm3,NaCl组为(2.88±0.28) cm3,MSC-TNF-α+溶瘤病毒组与MSC-TNF-α组比较,差异有统计学意义,t=2.39,P=0.044;MSC-TNF-α组与NaCl组比较,差异有统计学意义,t=7.72,P<0.001.MSC-TNF-α组TNF-α mRNA相对表达量为5.96±0.87,NaCl组为1.71±0.75,两组比较差异有统计学意义,t=6.652,P<0.001;MSC-TNF-α+溶瘤病毒组为5.81±1.11,与NaCl组比较,差异有统计学意义,t=6.423,P<0.001;MSC-TNF-α组与MSC-TNF-α+溶瘤病毒组比较,差异无统计学意义,t=0.229,P=0.825.病理切片显示,MSC-TNF-α+溶瘤病毒组坏死面积最大.Hoechst凋亡检测示,MSC-TNF-α+溶瘤病毒组细胞凋亡率最高,两治疗组肝脏和肾脏功能检测均正常.结论 转基因脐血间质干细胞旁分泌TNF-α联合溶瘤病毒对胃癌细胞具有明显的抑制杀伤作用.
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Key words
stomach neoplasms,tumor necrosis factor α,umbilical cord blood mesenchymal stem cell,oncolytic virus,animal model,nude mouse
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