过敏毒素 C3 a在肾小球足细胞中的分泌性表达试验

目的：建立过敏毒素C3 a分泌性表达慢病毒体系和分泌性高表达过敏毒素C3 a的足细胞株，为研究过敏毒素C3 a对足细胞的作用创造条件。方法人工合成过敏素素C3 a分泌性表达基因；以重组慢病毒为媒介，将过敏毒素C3 a分泌性表达基因导入到人足细胞系（human podocytes，HPC）；利用药物筛选和连续梯度稀释克隆法获得稳定整合有过敏毒素C3a转基因结构的HPC细胞株；利用实时定量PCR从mRNA水平、酶联免疫吸附测定方法从蛋白质水平对过敏毒素C3 a的表达和分泌情况进行鉴定。结果成功建立了过敏毒素C3 a分泌性表达慢病毒体系；获得了分泌性高表达过敏毒素C3 a的人肾小球足细胞株。结论所建立的过敏毒素C3 a分泌性表达慢病毒体系和分泌性高表达过敏毒素C3 a的足细胞株，为进一步分析过敏毒素C3 a对足细胞的作用创造了条件。