5-ALA治疗和hTERT mRNA的反义寡核苷酸联合应用对人卵巢癌细胞的杀伤作用及其机制

目的:观察5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)光动力治疗(PDT)和人端粒酶催化亚单位(hTERT)mRNA的反义寡核苷酸(ASODN)联合应用对人卵巢癌3AO细胞的增殖抑制及促凋亡作用,探讨两种方法联合应用协同促进对人卵巢癌3AO细胞的杀伤作用机制.方法:采用MTT法筛选不同浓度5-ALA和激光能量照射对人卵巢癌3AO细胞增殖抑制作用的最佳组合参数;RT-PCR法检测hTERT ASODN和SODN转染后hTERT mRNA表达水平的变化.将人卵巢癌3AO细胞分为空白对照组、hTERT ASODN转染组、hTERTSODN转染组、5-ALA PDT组、hTERT ASODN转染+5-ALA PDT组和hTERTSODN转染+5-ALA PDT组,应用MTT法检测各组人卵巢癌3AO细胞增殖抑制率;应用膜联蛋白V-硫氰酸荧光素(AnnexinV-FITC)/碘化丙啶(PI)双染色结合流式细胞术检测各组人卵巢癌3AO细胞凋亡率.结果:5-ALA PDT对人卵巢癌3AO细胞的增殖抑制作用随着光敏剂浓度的增加和激光能量的增大而增加(P＜0.05);不同浓度hTERT ASODN转染人卵巢癌3AO细胞24 h后,hTERT mRNA表达水平呈浓度依赖性下调(P＜0.05),而hTERT-SODN对人卵巢癌3AO细胞hTERT mRNA表达无显著影响(P＞0.05).hTERT ASODN转染+5-ALA PDT(5-ALA浓度为0.5 mmol·L-1,激光能量密度为2.50 J·cm-2)组人卵巢癌3AO细胞的增殖抑制率高于5-ALA PDT组和hTERT ASODN组(P＜0.05).hTERT ASODN转染+5-ALA PDT组人卵巢癌3AO细胞的凋亡率为29.28％,显著高于hTERT ASODN转染组(12.79％)和5-ALA PDT组(21.19％)(P＜0.05).结论:hTERT ASODN转染与5-ALA PDT联合治疗可协同增强对人卵巢癌3AO细胞的增殖抑制作用,其机制可能与联合作用促进细胞凋亡有关联.