硝呋齐特对甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响
Sichuan da xue xue bao. Yi xue ban = Journal of Sichuan University. Medical science edition(2019)
Abstract
目的 探讨硝呋齐特对甲状腺乳头状癌细胞BCPAP和TPC-1的增殖、迁移及侵袭的影响.方法 用不同浓度(0、1.25、2.5、5、10、20 μmol/L)硝呋齐特处理BCPAP和TPC-1细胞,采用MTT法和克隆形成实验观察硝呋齐特对细胞增殖的影响;采用Hoechst 33258染色及流式分选技术观察对细胞凋亡的影响;通过Westernblot法检测硝呋齐特处理后BCPAP细胞凋亡相关蛋白及迁移侵袭相关蛋白的表达情况;采用Transwell小室观察细胞迁移和侵袭能力.结果 硝呋齐特0、1.25、2.5 μmol/L处理BCPAP细胞,0、1.25μmol/L处理TPC-1细胞,24、48、72 h后细胞增殖力均未受到明显抑制(P>0.05);硝呋齐特5、10、20 μmol/L处理BCPAP细胞,10、20 μmol/L处理TPC-1细胞,24、48、72 h后细胞增殖力均受到明显抑制(P<0.05),且随浓度增加和时间延长其抑制作用逐渐增强;此外,2.5、5μmol/L硝呋齐特对TPC-1细胞的增殖抑制作用分别从72 h和48 h起效(P<0.05).暴露于10 μmol/L硝呋齐特10 d后,BCPAP和TPC-1细胞的克隆形成均受到抑制(P<0.05).10 μmol/L硝呋齐特处理48 h后,BCPAP和TPC-1细胞均出现细胞核改变,凋亡小体出现;流式分析显示BCPAP及TPC-1凋亡细胞增加(P<0.05).10 μmol/I硝呋齐特处理BCPAP细胞48 h,促凋亡蛋白CC-3、Bax的表达增加(P<0.05),而抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少(P<0.05);促迁移侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达减少(P<0.05),MMPs家族抑制剂——金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-2表达增加(P<0.05).10 μmol/L硝呋齐特处理BCPAP和TPC-1细胞48 h,BCPAP细胞及TPC-1细胞迁移率与侵袭率均下降(P<0.05).结论 硝呋齐特于体外抑制人甲状腺癌细胞系BCPAP和TPC-1的增殖,通过上调CC-3和Bax蛋白的表达诱导细胞凋亡,通过降低MMP-2和MMP-9蛋白的表达阻断细胞的迁移与侵袭.
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Key words
Invasion
,Migration
,Nifuroxazide
,Proliferation
,Thyroid cancer
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