不同饲料硒水平饲养大鼠的多组织内参基因筛选

目的 筛选不同饲料硒(selenium,Se)水平饲喂大鼠时,不同组织中稳定表达的内参基因(reference genes,RGs).方法 24只断乳雄性SD大鼠在缺Se饲养5周后,随机均分为4组,分别以Se含量＜0.01、0.25、3、5 mg/kg饲料饲喂4周后处死,取肝、睾丸、骨骼肌、脂肪组织等样品待检.以荧光定量PCR检测Actb、Atp5f1、B2m、Gapdh、Gusb、Hprt、Pgk1、Ppia、Rplp2、Rps18、Tbp、Ywhaz等12个候选内参基因的mRNA水平,以geNorm、NormFinder、BestKeeper、Delta CT和RefFinder等方法对其表达稳定性进行评价.结果 各组织中稳定性排名前4的内参基因是:肝中Ppia＞Atp5f1＞Rplp2 ＞Hprt;睾丸中Ywhaz＞Atp5f1 ＞Rplp2＞ Ppia;骨骼肌中Tbp＞Ppia＞B2m＞Rps18;脂肪组织中Hprt＞ Tbp ＞Atp5f1 ＞Pgk1;综合4种组织,则Rps18＞Hprt＞Rplp2＞Atp5f1.结论 分析不同饲料Se水平饲养大鼠的目标基因表达水平时,应根据组织类型选择适宜的内参基因.