NDGA联合塞来昔布对结肠癌细胞诱导凋亡的研究

目的 观察5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)抑制剂去甲二氢愈创木酸(nordihydroguaiaretic acid,NDGA)联合选择性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂塞来昔布(Celecoxib)对结肠癌细胞株HT-29细胞凋亡的影响.方法 用不同浓度NDGA及塞来昔布处理HT-29细胞,应用甲基偶氮唑蓝(MTT)法、倒置相差显微镜观察、Annexin V/PI法和RT-PCR方法,研究其抑制HT-29细胞增殖,诱导凋亡的作用.结果 MTT法显示,与对照组相比,NDGA和塞来昔布及两药联用组细胞活性下降(0.432±0.024、0.425±0.013、0.303±0.014 vs 0.693±0.018,t＝18.79,25.75,37.64,P＜0.01).NDGA联合塞来昔布组与单独应用NDGA或塞来昔布差异有统计学意义(t＝10.21,14.14,P＜0.01).倒置相差显微镜下显示两种药物都能使体外培养的结肠癌HT-29细胞的形态发生明显变化,而两种药物联合应用后变化更明显.激光共聚焦显微镜下显示应用NDGA及塞来昔布后可以引起HT-29细胞凋亡.RT-PCR检测发现药物作用后Caspase-3表达上调,两种药物联合应用后上调最多.结论 MDGA联合塞来昔布较之单独应用可以更强抑制体外培养的HT-29细胞增殖,并诱导凋亡,其抑制HT-29细胞诱导凋亡机制与激活Caspase-3途径有关.