吡嗪酰胺耐药性结核分枝杆菌的噬菌体检测技术研究

目的建立噬菌体生物扩增法(PhaB)快速测定吡嗪酰胺耐药性,并探讨其在结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药性测定中的应用价值。方法应用建立的 PhaB 测定108株结核分枝杆菌临床分离株的吡嗪酰胺耐药性,并与绝对浓度法的药敏结果进行比较,对不符合的菌株进行最低抑菌浓度(MIC)测定和序列测定分析。结果 PhaB 检测吡嗪酰胺耐药性的最佳测定条件为 pH 值5.5、药物浓度200μg/ml、37℃作用48 h。用绝对浓度法检测108株结核分枝杆菌临床分离株,其中吡嗪酰胺敏感33株、耐药75株;用 PhaB 检测该108株结核分枝杆菌临床分离株,若以噬菌斑减少95%为判断标准,则吡嗪酰胺敏感32株,耐药76株。2种方法检测均为敏感的为28株,均为耐药的为71株,符合率为91.7%;2种方法检测结果不符的为9株,其中5株的 PhaB 结果与 MIC 结果相符,4株的结果不符,测序结果表明9株中有7株的 PhaB 结果与测序结果相符。如以绝对浓度法药敏结果为判断标准,PhaB 检测吡嗪酰胺耐药性的敏感性为94.7%,特异性为84.8%,阳性预测值为93.4%,阴性预测值为87.5%,准确性为91.7%。结论 PhaB 测定吡嗪酰胺耐药性简便、快速,3 d 即可获得药敏结果,可作为吡嗪酰胺耐药性的快速筛选方法。