氧化苦参碱协同骨髓间充质干细胞治疗大鼠肝纤维化的实验研究

目的 探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OM)协同骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)的影响,并初步探索其机制.方法 50只雄性SD大鼠随机分为5组,即正常对照组、模型组、MSCs组、OM组及OM-MSCs联合治疗组,每组10只.除正常对照组外,其余大鼠均复制CCl4诱导的HF模型.造模成功后,MSCs组尾静脉注射MSCs 5×106个/只,1次/周；OM组肌肉注射OM 50 mg/kg,3次/周；OM-MSCs联合治疗组肌肉注射OM 50mg/kg,3次/周,尾静脉注射MSCs 5×106个/只,1次/周.正常对照组、模型组给予等量的生理盐水处理.共给药8周.8周后检测各组大鼠血清ALT及AST水平,利用HE染色和Masson染色评价肝脏病理损伤及细胞外基质沉积情况.利用酶联免疫吸附法检测大鼠血清中白介素-4(IL-4)和白介素-10(IL-10)的表达.结果 (1)与正常对照组比较,模型组大鼠血清中ALT、AST水平明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).与模型组比较,8周末OM组、MSCs组及OM+MSCs联合治疗组血清ALT、AST水平显著下降(P＜0.05)；但OM+MSCs联合治疗组的血清ALT、AST水平显著低于OM组及MSCs组(P＜0.05).(2)与模型组比较,OM组、MSCs组及OM+ MSCs联合治疗组的肝损伤减轻、细胞外基质沉积面积显著减少(P＜0.05),且OM+MSCs联合治疗组较OM组、MSCs组更为显著(P＜0.05).(3)与模型组比较,MSCs组、OM+MSCs联合治疗组血清中IL-4水平显著升高(P＜0.05),且后两组比较,后者升高更为显著(P＜0.05)；OM治疗组IL-4水平亦升高,但差异无统计学意义(P＞0.05).(4)OM组、MSCs组及OM+MSCs联合治疗组的血清IL-10的水平显著升高(P＜0.05),其中OM+ MSCs联合治疗组IL-10的水平升高更为显著(P＜0.05).(5)双光子显微镜显示MSCs注射至大鼠体内后未在肝脏定植,OM也未增加MSCs在肝脏的定植.结论 OM可协同MSCs减轻CCl4诱导的HF,这可能与增加血清中IL-4和IL-10水平有关.