鸭源H9N2亚型禽流感病毒血凝素基因的克隆、序列分析及原核表达
Wuhan University Journal（2004）
Abstract
参照GenBank收录的H9N2亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因序列设计并合成引物,以鸭源H9N2亚型禽流感病毒RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增了预计约1700 bp的HA基因,将此扩增产物克隆进pMD18-T 载体,采用限制性酶切及序列测定鉴定阳性重组克隆子.测序结果表明HA基因长为1 683 bp.基于HA 蛋白的信号肽在表达中的负面作用,本研究通过基因工程手段缺失HA蛋白位于起始的信号肽的编码序列,获得了缺失HA蛋白信号肽的HA基因,并将其亚克隆到pGEX-KG中,与GST融合表达.SDS-PAGE结果显示:融合表达的蛋白分子量约为90×103.Western 印迹表明表达蛋白具有免疫活性.
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avian influenza virus,duck-derived
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