应用锁式探针滚环扩增检测小鼠畸胎瘤分化过程中单细胞基因表达水平
Basic & Clinical Medicine(2011)
Abstract
目的应用锁式探针介导的滚环扩增技术(Padlock-RCA)原位检测干细胞分化过程中单细胞mRNA表达水平。方法利用维甲酸(RA)诱导小鼠畸胎瘤细胞F9分化模型,应用锁式探针滚环扩增原位基因检测技术检测Nanog在其分化前后单细胞mRNA表达水平,结合实时定量RT-PCR分析该方法的效果。结果锁式探针滚环扩增原位基因表达检测方法能够检测单个细胞mRNA表达水平,并能够有效的反映F9细胞分化前较分化后Nanog基因表达水平显著降低(P<0.05)。结论成功应用锁式探针滚环扩增原位基因表达检测技术分析Nanog基因在F9分化前后单细胞中表达水平,为进一步研究单细胞基因表达及细胞亚群功能分析提供了一种可靠的新方法。
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Key words
mouse teratocarcinoma cell,differentiation,mRNA,padlock-RCA
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