两个遗传性凝血因子Ⅶ缺陷家系的表型及基因型分析

目的 对2例遗传性凝血因子Ⅶ(factorⅦ,FⅦ)缺陷症患者家系进行临床表型和基因变异分析,并探讨其分子发病机制.方法 对先证者F7基因第1～9外显子及其侧翼序列进行PCR扩增、纯化和测序,寻找变异位点,对于新发现的错义变异位点排除多态性后,采用SWISS-MODEL建模,用Pymol软件分析蛋白结构的改变,同时分析该位点氨基酸在物种间的保守性.结果 家系1先证者凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、凝血因子Ⅶ活性(FⅦactivity,FⅧ∶C)和凝血因子Ⅶ抗原(FⅦantigen,FⅦ∶Ag)分别为36.3 s、3％和53.56％;测序结果显示先证者F7基因第1外显子c.80 81delCT和第9外显子c.1371G＞T(p.Arg439Ser)的复合杂合变异,其儿子携带c.1371G＞T(p.Arg439Ser)杂合变异.家系2先证者的PT 22.3 s、FⅦ∶C4％和FⅦ∶Ag 1.58％;携带F7基因第3外显子c.278G＞T (p.Arg75Met)和第9外显子c.1278T＞G(p.His408Gln)的复合杂合错义变异,先证者母亲和儿子携带c.278G＞T(p.Arg75Met)杂合变异.三维模拟软件分析提示p.Arg439Ser和p.Arg75Met会引起局部基团氢键的改变,物种间蛋白质同源性分析也表明这两个氨基酸高度保守.结论 F7基因c.1371G＞T(p.Arg439Ser)和c.278G＞T(p.Arg75Met)变异均为未报道过的新变异,推测这两种变异可能会影响Ⅶ因子的功能,可能是两先证者的致病原因.