血管内皮生长因子受体KDR的靶向制剂的制备

目的:研究从噬菌体肽库中筛选到的与血管内皮生长因子受体Ⅱ(KDR)有特异结合活性的小肽,做为KDR靶向药物的先导物质的应用.方法:从噬菌体肽库中筛选能特异结合KDR的噬菌体克隆,挑选结合力最强的克隆测序并化学合成小肽P5,梯度ELISA、阻断实验和竞争结合实验测定小肽在体外与KDR的结合活性.将P5与生物素(NHS-d-Biotin)、BSA化学偶联,ELISA法和细胞免疫组化实验检测偶联物与KDR的结合活性.结果:化学合成的小肽P5在体外能特异结合KDR,Kd＝168.6 nmol/L,约是KDR与配体血管内皮生长因子(VEGF165)亲和力的1/30,P5能阻断VEGF165与KDR的结合活性,但不能竞争VEGF165与KDR的结合活性.将P5作为导向物质化学合成的P5-BSA-Biotin,在体外同样具有与KDR和细胞表面KDR分子结合的特性.结论:化学合成的小肽P5有望作为先导分子,在以KDR为靶点的肿瘤靶向治疗中得到应用.