烟草CuZnSOD同工酶的分离纯化与鉴定
Journal of Instrumental Analysis(2004)
Abstract
利用硫酸铵盐析分级分离、乙醇-氯仿沉淀除杂、丙酮再沉淀分级得到含铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)的粗酶液, 通过 DEAE-52离子交换层析实现了 3种 CuZnSOD同工酶的拆分; 进一步通过 G-75凝胶层析对 3种同工酶分离纯化得到 2种电泳纯产品 CuZnSOD Ⅰ和 CuZnSODⅢ; SDS- PAGE实验发现 CuZnSODⅠ由两个不等亚基组成, 亚基相对分子质量分别为 15 050、 20 950; CuZnSODⅢ存在一种亚基, 亚基相对分子质量为 22 950; 实验检测到 2种纯酶分子含有不等量的 Cu和 Zn, 酶学特性实验也证实了 2种蛋白酶都是 CuZnSOD.
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cuznsod isoenzymes,tobacco,separationpurification
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