经外膜缓释雷帕霉素抑制移植血管内膜增生的实验研究

目的建立兔肾下腹主动脉人造血管移植模型,探讨雷帕霉素抑制人造血管移植后再狭窄的作用机制。方法健康雄性新西兰大耳白兔18只,体质量2.5～3.0 kg,随机分为A、B、C3组,每组6只,构建PTFE人造血管腹主动脉移植模型,血管吻合完成后各组给予不同处理。A组:移植血管不给予任何处理;B组:在移植血管外膜及吻合口周围涂抹配制好的20 pluronic F-127多聚凝胶0.5ml;C组:在移植血管外膜及吻合口周围涂抹携带雷帕霉素0.5mg的pluronic F-127多聚凝胶0.5ml。术后1月获取移植血管,组织形态学方法观察移植血管内膜增生情况,计算机图像分析系统测量移植血管内膜及中膜厚度,并计算内膜增生程度(内膜/中膜),免疫组化SP法检测移植血管α-actin、PCNA和p27kip1的表达。结果①术后1月,A组、B组较C组内膜增生明显(P<0.05)。②增生的血管内膜均可见α-actin阳性表达,类似于血管平滑肌α-actin阳性表达,证实增生的血管内膜于最表层细胞层下表达平滑肌活性。③PCNA、p27kip1免疫组化观察为胞核着色,阳性细胞呈棕黄色。各组移植血管增生的内膜均可见不同程度的阳性表达。④α-actin和PCNA的表达,C组较A、B组明显降低(P<0.05)。p27kip1的表达,C组分别A、B组明显增多(P<0.05)。A组与B组之间各组数据比较无显著差异(P>0.05)。结论①pluronic F-127多聚凝胶携带雷帕霉素涂抹移植血管外膜可有效抑制移植血管平滑肌细胞增殖。②雷帕霉素抑制移植血管再狭窄的机制与其上调移植血管组织中p27kip1的表达、细胞增殖周期受抑有关。