单链抗体融合重构型人caspase-3蛋白的靶向抑瘤作用研究

目的:探讨分泌表达的抗ErbB2单链抗体与重构型人caspase-3融合蛋白对ErbB2抗原阳性肿瘤细胞的靶向杀伤作用.方法:将重构型人caspase-3基因亚克隆入pCMV-e23scFv-PEⅡ-PEⅢ相应位点,构建表达分泌型的抗ErbB2单链抗体与重构型人caspase-3融合蛋白基因的真核表达载体pCMV-e23scFv-PEⅡ-revcasp-3,转染人T淋巴瘤细胞系Jurkat,筛选并建系,ELISA检测培养上清中融合蛋白的分泌表达.用含有该融合蛋白的培养介质培养人宫颈癌细胞Hela、乳腺癌细胞SKBr3以及人卵巢癌细胞SKOV3等研究该蛋白对细胞生长的抑制作用;将转染建系的Jurkat细胞尾静脉注射SKBr3荷瘤裸鼠研究其对肿瘤的抑制作用,间接免疫荧光检测重构型人caspase-3蛋白在瘤体的靶向分布.结果:融合蛋白基因可通过Jurkat细胞分泌表达并杀伤ErbB2抗原阳性的SKBr3和SKOV3细胞而对ErbB2抗原阴性的Hela细胞生长无明显影响,尾静脉注射该细胞可靶向抑制荷瘤裸鼠肿瘤生长.结论:分泌表达的抗ErbB2单链抗体与重构型人caspase-3融合蛋白靶向诱导ErbB2抗原阳性肿瘤细胞死亡.