肥胖引起的线粒体功能及抗氧化异常促进小鼠卵母细胞排卵后老化

目的:探讨肥胖对小鼠卵母细胞体内老化、体外受精和胚胎发育的影响及其机制.方法:分别获取人绒毛膜促性腺激素(HCG)注射后14 h、18 h和22 h的卵母细胞-卵丘颗粒细胞复合体,进行体外受精胚胎培养,采用Hoechst 33342和碘化丙啶双染检测卵丘颗粒细胞的凋亡率,JC-1和DCFH-DA分别检测卵母细胞中线粒体膜电位(MMP)和活性氧类(ROS)水平,并检测卵母细胞中ATP和谷胱甘肽(GSH)水平.结果:刚排卵时肥胖小鼠卵母细胞GSH低于对照组(P<0.05),囊胚形成率、ATP、ROS和卵丘颗粒细胞凋亡率两组无显著差别(P>0.05);HCG注射后18 h,肥胖小鼠卵母细胞中ATP含量及囊胚细胞数目开始明显减少并低于对照组(P<0.05),而卵母细胞中ROS水平和卵丘颗粒细胞凋亡率则开始升高并高于对照组(P<0.05);HCG注射后22 h,肥胖小鼠卵母细胞MMP和体外受精囊胚形成率显著下降(P<0.05),并且低于对照组(P<0.05).结论:肥胖促进排卵后卵母细胞的老化,氧自由基对卵母细胞的损伤可能是引起母源老化不孕的重要原因.