两株大肠杆菌烈性噬菌体的分离与生物学特征研究

目的:以大肠杆菌285为宿主菌从医院污水中分离噬菌体,对其生物学特点进行研究,并与f2噬菌体的生物学特点进行比较。方法:四步法污水分离噬菌体;单、双层平板噬菌斑实验筛选烈性噬菌体并观察噬菌斑形态;纯化后2%磷钨酸染色电镜观察;利用双层平板噬菌斑实验测定最佳感染复数;紫外线照射观察耐受时间。结果:成功分离出大肠杆菌285烈性噬菌体2株(EcP1、EcP2),EcP1噬菌斑直径3~5 mm(培养12 h),逆光观察噬菌斑呈全透明状,该噬菌体有一个长多面体立体对称的头部,头长径(L)约47 nm,头横径(W)约35 nm,L/W=1.34,无囊膜,有一短尾,尾长约20 nm;EcP2噬菌斑直径约1 mm(培养12 h),逆光观察噬菌斑呈全透明状,该噬菌体有一个长多面体立体对称的头部,头长径(L)约89 nm,头横径(W)约54 nm,L/W=1.65,无囊膜,有一长尾,有尾鞘,尾长约81 nm。EcP2可噬大肠杆菌8099形成直径约1 mm的圆形噬菌斑。f2噬大肠杆菌285形成圆形直径2~3 mm的噬菌斑,逆光观察噬菌斑呈全透明状,f2呈微球形,直径51~113 nm。EcP1和EcP2最佳感染复数分别为10和0.1,在紫外灯(光强221μW/cm2)下暴露8和4 min可全部失活。结论:按照国际病毒分类委员会分类标准,所分离的两株噬菌体分属于短尾噬菌体科(EcP1)和肌尾噬菌体科(EcP2)烈性噬菌体,按照Bradley和Ackermann形态分类法分属于C2亚群和近似A2亚群;其中EcP2为一株宽噬噬菌体。两株噬菌体头部大小较呼吸道病毒中流感病毒、副黏病毒、冠状病毒都小。