检测细胞中1-磷酸鞘氨醇含量的LC-MS/MS分析方法的建立

目的建立并确证可以检测1-磷酸鞘氨醇(S1P)快速、灵敏、特异的LC-MS/MS定量分析方法。方法采用C17-S1P作为内参,甲醇一步法进行蛋白沉淀,随后进行正相电喷雾离子化LC-MS/MS分析。流动相为甲醇-0.1%甲酸水(95∶5,v/v),流速0.2mL/min,每个样品的分析时间为4min。细胞经TNF-α处理后S1P含量显著增加;而经DMS处理后S1P含量显著下降。结果 S1P的标准曲线线性范围为0.1～10ng/mL。相关系数r2均大于0.989。结论该方法可以快速,灵敏,特异性地同时检测生物样品中S1P的含量。