用培养人脐静脉内皮细胞法观察体外循环对内皮细胞的损伤作用

目的采用体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC),观察体外循环(CPB)后人体炎性血浆对内皮细胞(EC)的影响. 方法选取风湿性心瓣膜病行人工瓣膜置换术患者20例,取不同时间点的CPB血浆.将已培养好的HUVEC随机分为4组,对照组:加入正常培养基;Ⅰ组:加入CPB 45分钟的血浆;Ⅱ组:加入CPB 90分钟的血浆;Ⅲ组:加入CPB 90分钟血浆+抑肽酶.观察未贴壁悬浮EC、组织型纤活酶激活物(t-PA)功能、EC分泌血小板颗粒膜蛋白-140(GMP-140) 、6-酮-前列腺素F1α(6-K-PGF1α)和乙酰胆碱刺激EC合成NO的变化. 结果悬浮细胞数和t-PA,Ⅱ组和Ⅲ组显著高于对照组,Ⅲ组与Ⅱ组比较显著降低(P＜0.01).各组间GMP-140差别均无显著性意义.6-K-PGF1α,Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组均显著高于对照组,Ⅲ组与Ⅱ组比较显著降低(P＜0.05).NOⅠ组比对照组显著升高,Ⅱ组比对照组显著降低;Ⅲ组与Ⅱ组比较显著升高(P＜0.05). 结论 CPB可激活或损伤EC,抑肽酶可减轻此作用,用培养的HUVEC研究CPB损伤EC的机制是一种可行的方法.