卵泡刺激素剂量依赖性表达基因的筛选

为开发能高效检测卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)制品生物活性的新方法,选取猪卵泡颗粒细胞,利用转录组测序技术对比FSH处理组(40 mIU/mL)和空白对照组细胞中基因的表达情况,分析并获得大量受FSH调控的候选基因,运用荧光定量聚合酶链式反应验证FSH处理后显著上调的基因,并进一步利用FSH浓度梯度(0、20、40、60、80、100 mIU/mL)处理卵泡颗粒细胞.结果显示,基因OLR1、LHCGR、SCARA5和S100A12的表达量呈现FSH浓度依赖性升高.在3倍递增的FSH浓度梯度(0、1、3、9、27、81、243、729 mIU/mL)下观察各基因表达量的变化,发现在0~243 mIU/mL的FSH浓度范围内,LHCGR基因的表达量与FSH浓度呈高度线性相关(R2=0.982).因此,可通过检测FSH刺激条件下细胞中LHCGR基因的表达量,来评估FSH制品的生物学效价.