烟草脱落酸受体基因NtPYR1和NtPYL9的克隆及表达模式分析

为揭示烟草脱落酸(ABA)受体基因NtPYR1和NtPYL9的生物学功能，以拟南芥PYR1和PYL9基因为探针，在NCBI中通过同源比对查找普通烟草表达序列标签（Expressed sequence tag, EST)序列，将EST序列进行拼接并设计特异性引物，从普通烟草红花大金元cDNA文库中克隆出NtPYR1和NtPYL9基因，其开放阅读框长分别为678 bp和564 bp，分别编码225个和187个氨基酸。NtPYR1和NtPYL9蛋白都具有一个保守的疏水性结构域，同属于PYR/PYL/RCAR ABA受体基因家族， NtPYR1和NtPYL9与番茄同源蛋白的相似性分别达到79.10%和95.24%。遗传聚类分析结果显示：NtPYR1和NtPYL9与番茄和马铃薯同源基因的遗传进化距离最近，说明PYR1和PYL9在茄科植物中较为保守。定量PCR对烟草不同组织表达模式分析表明，NtPYR1和NtPYL9在烟草不同组织中均有表达，分别在子叶和须根中的表达量最高。NtPYR1和NtPYL9表达均受ABA抑制，同时受H2O2诱导，说明两基因可能参与烟草的抗逆生理过程。