逆转录交叉引物等温扩增检测南方菜豆花叶病毒方法的建立

南方菜豆花叶病毒(southem bean mosaic virus,SBMV)是我国进境植物检疫性病毒,可随豆类种子远距离传播.本研究针对SBMV的外壳蛋白(coat protein,CP)基因序列设计特异引物组,建立了一种反转录(reverse transcription,RT)交叉引物扩增(cross-priming amplification,CPA)快速检测方法,并分别结合实时荧光和侧向层析试纸条(lateral flow dipstick,LFD)检测扩增产物构建了实时荧光RT-CPA和RT-CPA-LFD体系.结果 显示,所建立的针对SBMV的RT-CPA检测方法特异性强,以其他4种可随豆类种传的植物检疫性病毒为对照,均无交叉反应.其中,实时荧光RT-CPA和RT-CPA-LFD检测SBMV灵敏度分别达5× 10-4 ng/μL和5 ng/μL.所建立的RT-CPA检测SBMV方法具有快速、准确、可视化等优点,在口岸检测中具有良好的应用前景.