P物质对HaCaT细胞一氧化氮合成的影响

目的 观察P物质、NK1受体拮抗剂和一氧化氮合酶(NOS)抑制剂对体外培养的人永生化角质形成细胞株HaCaT细胞一氧化氮(NO)分泌和诱生型NOS(iNOS)表达的影响.方法 用不同浓度P物质(10-9～10-6mol/L)或联合应用10-8mol/L P物质和3×10-7mol/L spantide、10-7 mol/L氨基胍、10-6mol/L7-硝基吲唑、10-5 mol/L L-NAME处理HaCaT细胞24 h,硝酸还原酶法测定培养上清液中NO含量.HaCaT细胞中加入1O-8 mol/L P物质,1 h、24 h、48 h后用RT-PCR检测iNOS mRNA表达.结果 10-9～10-9mol/L P物质可诱导HaCaT细胞分泌NO,其中以10-8mol/L P物质效应最明显.Spantide在各个时间点上(30 min及1、3、6、12、24 h)均可明显抑制P物质诱导的HaCaT细胞NO合成(P＜0.01),L-NAME组在3个时间点上(30 min、1 h、24 h)、7-硝基吲唑组在30 min、1 h后HaCaT细胞NO水平明显低于P物质组(P＜0.05),但氨基胍组与P物质组在各个时间点上差异均无统计学意义(P＞0.05).10-8 mo1/L P物质处理HaCaT细胞后24 h、48 h,iNOS mRNA表达量分别为0.199±0.018、0.516±0.030,两个时间点之间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 P物质可通过激活细胞上NK1受体促进HaCaT细胞分泌NO,但iNOS可能不是P物质诱导HaCaT细胞分泌NO的主要来源.