AtPAP1基因在烟草中的表达

AtPAP1（Arabidopsis thaliana production of anthocyanin pigment 1）是拟南芥花青素生物合成途径中的关键调控基因。为实现花青素在烟草中的表达，利用烟草腺毛特异表达启动子proCYP71D16，构建AtPAP1特异表达载体pCAMBIA1391-CYP71D16-PAP1，并将其与载体pCAMBIA1391-35S-PAP1通过农杆菌介导法进行烟草遗传转化，对所得的转基因烟株进行分子检测和表型观察，同时测定转基因烟叶中花青素的含量。结果表明：35S：AtPAP1烟株叶片表面呈红色，腺头呈绿色，腺柄细胞无色；CYP71D16：AtPAP1烟株叶片表面呈绿色，叶片分泌型腺毛的腺头呈明显粉红色；对照烟草叶片及叶面腺毛均呈绿色。HPLC检测结果表明，在35S：AtPAP1转基因烟株中发现有矢车菊色素和天竺葵色素的积累；在CYP71D16：AtPAP1转基因烟株中仅发现矢车菊色素有少量积累；对照烟株中没有检测到花青素。本研究中实现了AtPAP1基因在烟草中的表达，为研究烟草物质代谢提供了理论依据。